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上海信裕生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,檢測試劑盒,白介素試劑盒,試劑盒,重組蛋白,單克隆抗體,多克隆抗體,細胞系,原代細胞,胎牛血清,生化試劑,實驗室耗材,abcam抗體等科研產(chǎn)品 |

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更新時間:2016-09-07 15:04:48瀏覽次數(shù):237
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人血管生成素-2檢測試劑盒檢測時的問題:
1.為什么標準品的OD值會是上圖的結(jié)果?真的是想不出來為什么會這樣呀?
答:你的標準品除了標4中有一孔偏低至0.622外,其余幾乎無任何線性,實際上我懷疑你的標40.622這孔做的有問題,真實的結(jié)果應(yīng)該是全部標準曲線OD值都應(yīng)該在1.5—2.0左右波動,試劑盒的標曲可看出有明顯的線性關(guān)系:
2.人血管生成素-2檢測試劑盒雖然待測樣品3個復(fù)孔間差異不是很大,但我們也可以看到所有的待測樣品OD值差異也不是很大,其中樣9和樣10為正常人尿標本,其值也很大,所以,想請問一下,這種現(xiàn)象正常嗎?
答:血管緊張素原正常人和病人之間是否有差異,*取決于血管緊張素原這個指標與某種疾病之間特異性、敏感性怎么樣,如果大量的文獻顯示正常組與患病組間存在顯著差異,那我認為你這個結(jié)果不正常。我之前提示過你:“在看定量的試劑盒至少要有一個0點吧畢竟它代表了試劑盒包被抗體和酶標抗體的交叉反應(yīng)情況(也就是試劑盒的背景),樣本定值時至少要減去0點在定量吧,可使你的試劑盒只有一個空白孔(不加酶標試劑)只能算作顯色液的背景”如果你上圖結(jié)果中的空白孔還是不加酶標試劑的話,我懷疑你的試劑盒酶標試劑和板有交叉反應(yīng),你所有的樣本OD值可能都是你試劑盒交叉反應(yīng)的結(jié)果,你可以用純化水或試劑盒中的樣稀(里面肯定不含有血管緊張素原)當做樣本進行加樣,洗板后加酶,zui終看看OD值是多少!
3.人血管生成素-2檢測試劑盒加入終止液后,有的孔的顏色沒有立即由藍色變?yōu)辄S色(比如前邊的標準孔,但隨著加后邊的樣,前邊的孔就會*變成黃色。),所以,后邊的孔加了終止液之后,如果沒有*變?yōu)辄S色,此時,我應(yīng)該立即測OD值呢?還是應(yīng)該等全都變黃色之后再測呢?
答:顏色沒有立即變藍的原因可能是終止液的酸度不是太強,這個跟試劑盒有關(guān)系,你不用管,必須等到全部變成黃色才能讀值,因為OD450nm,就是對黃色有zui大吸收。
4.人血管生成素-2檢測試劑盒由上圖可以看到,雖然都在規(guī)定的時間內(nèi)測得OD值,同一孔的數(shù)值也發(fā)生生了變化,有的孔變大了,有的孔變小了,這是什么原因造成的呢?我該以哪一次的數(shù)值為準呢?
答:多樣本的OD值*次測定高、第二次低、第三次又再次高上去說明你的酶標儀這個儀器本身的變異有點大,其實以那一次的結(jié)果都可以,因為如果是合格的試劑盒,即使OD值有所變化,但是不同組間的差異一定還是能看出來的。