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大鼠雌激素α受體受(ER-α)試劑盒

閱讀:58          發(fā)布時間:2019-6-24
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                 大鼠雌激素α受體受(ER-α)試劑盒

該試劑盒以 HRP 標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物(HRP Streptavidin Conjugate,

HRP-SA)為基礎(chǔ),可用于檢測大鼠子宮及相關(guān)樣本內(nèi)的特異性雌激素α受體(ER-

α)抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所

用的雌激素α受體(ER-α)一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后,用生物化二抗與一抗特異

性結(jié)合,后加入 HRP-SA,形成抗原—特異一抗—*化二抗—HRP-SA 復(fù)合

物,顯微鏡下觀察成像。 

三羥基氨基甲烷 1.21g 

氯化鈉 7.6g 

加蒸餾水 800mL,濃鹽酸調(diào) pH 值至 7.2~7.4,后定容至 1000mL TBS-T:TBS+Tween 20(0.05%體積比) 

2.抗原修復(fù)液(依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液) 

10mM pH6.0 檸檬酸緩沖液 

檸檬酸 0.38g 

檸檬酸三鈉 2.45g 

加蒸餾水 900mL,濃鹽酸調(diào) pH 值至 6.0,后定容至 1000mL 

或:0.5M EDTA 修復(fù)液(pH8.0) 

EDTA·2H2O 186.1g 

加蒸餾水 700mL,用 10mM NaOH 調(diào) pH 值至 8.0,后定容至 1000Ml 

3. 緩沖甘油封固劑 10 mL 

4. Tween 20 5 mL 

注意事項: 

1. 修復(fù)后緩沖液須自然冷卻,自來水沖洗后方能把切片取出,驟冷有可能導(dǎo)致

結(jié)晶或抗原封閉。 

2. 緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到,用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使

用。 

3. 若試劑為微量濃縮液,用前應(yīng)低速離心,將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。 

4. 封片前一定要換用 TBS 充分洗滌,以便洗去組織上殘留的 Tween 20,否則會

影響結(jié)果觀察。 

5. 如須復(fù)染細(xì)胞核,則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封

片。 

附 1: 

 

抗原修復(fù)方法

常用抗原修復(fù)液:檸檬酸緩沖液(0.01M pH6.0)、EDTA 抗原修復(fù)液(pH8.0 或

9.0)等等。 

一、酶消化修復(fù)法酶消化修復(fù)

切片脫蠟水化處理,TBS 沖洗,在組織上滴加*或*,37℃孵育

20~30min 后 TBS 沖洗即可。 

二、微波抗微波 原修復(fù)法

微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰,將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料

切片架上,放入已沸騰的緩沖液中,中檔或繼續(xù)微波 10~15min,取出微波

盒冷卻至室溫后,自來水沖洗,取出切片。因不同微波爐微波處理時間存在差異,

須自行調(diào)整。 

三、直接高壓抗原修復(fù)法

取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰,將組織切片置于耐高溫切片架上,修復(fù)

液沸騰后放入切片架,蓋上鍋蓋,待噴氣后計時 1.5~2.5min 即可脫離熱源,自

然冷卻至室溫后自來水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。 

四、隔水式高壓抗原修復(fù)法

不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰,微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸

騰,將切片放入微波盒中,再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋,待噴氣后計時

4~8 min 即可關(guān)閉熱源,自然冷卻至室溫后自來水沖洗,取出切片。此方法適用

于較難檢測或核抗原的修復(fù)。 

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