凍干新鮮補(bǔ)體豚鼠血清的正確運(yùn)用

信帆生物供應(yīng)凍干新鮮補(bǔ)體豚鼠血清，產(chǎn)品備有大量現(xiàn)貨，質(zhì)量穩(wěn)定，深受廣大科研用戶青睞！

 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(complement fixation test，CFT)該試驗(yàn)是在補(bǔ)體參與下，以綿羊紅細(xì)胞和溶血素作為指示系統(tǒng)，來檢測未知的抗原或抗體的血清學(xué)試驗(yàn)。有五種成分參與，分為指示系統(tǒng)和待檢系統(tǒng)(已知抗原和未知抗體或已知抗體和未知抗原)。補(bǔ)體用新鮮豚鼠血清。方法是將已知的抗原或抗體與未知標(biāo)本(可能含相應(yīng)抗體或抗原)充分混合，再加入補(bǔ)體作用一段時(shí)間，后加入指示系統(tǒng)。若待檢系統(tǒng)有相應(yīng)抗體或抗原，則能形成抗原抗體復(fù)合物，從而消耗了補(bǔ)體不出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，此為陽性；相反，出現(xiàn)溶血則為陰性。補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)的影響因素較多，正式試驗(yàn)前需對已知成分作一系列滴定，尤其是補(bǔ)體，應(yīng)選擇適宜的量參與反應(yīng)，避免假性結(jié)果。每次試驗(yàn)尚需同時(shí)設(shè)立多種對照，以作為判斷結(jié)果可靠性的依據(jù)。該法對顆粒性或可溶性抗原均適用，臨床上常用于檢測某些病毒、立克次氏體和螺旋體感染者血清內(nèi)的中的抗體，亦可用于某些病毒的分型。

補(bǔ)體結(jié)合，利用抗原抗體復(fù)合物同補(bǔ)體結(jié)合，把含有已知濃度的補(bǔ)體反應(yīng)液中的補(bǔ)體消耗掉使?jié)舛葴p低的現(xiàn)象，以檢出抗原或抗體的試驗(yàn)。首先將經(jīng)過56℃處理30分鐘使補(bǔ)體滅活的抗血清，與抗原及補(bǔ)體（通常將豚鼠血清作適當(dāng)稀釋后使用）混合使起反應(yīng)。第二是加入已同抗綿羊紅細(xì)胞抗體相結(jié)合的綿羊紅細(xì)胞（致敏紅細(xì)胞）。在初階段對消耗補(bǔ)體建立起足夠的抗原抗體反應(yīng)時(shí)，沒有發(fā)生致敏紅細(xì)胞的溶血，但補(bǔ)體剩余下來則引起溶血反應(yīng)。

一、血清制備 由于豚鼠血清中，含有對人精有毒性的物質(zhì)，因此用作補(bǔ)體的豚鼠血清，應(yīng)在合并之前逐只檢查，僅把無精制動作用的豚鼠血清合并，用溶血反應(yīng)測定血清的補(bǔ)體效價(jià)(C'H)，以無精制動作用的未婚女性血清，調(diào)整補(bǔ)體效價(jià)為 200C'H 左右，確保制動反應(yīng)系統(tǒng)有足夠的補(bǔ)體量(10C'H)參與。豚鼠血清以 0.5mL 分裝于小試管內(nèi)，置 - 70℃保存?zhèn)溆??！?/span>

(1) 作補(bǔ)體用的豚鼠血清制備：一次用10-15只豚鼠，分別從心臟采血，低溫下分離血清，分別以精制動試驗(yàn)檢測對人精有無毒性，具體方法如下。

　① 試驗(yàn)組：　處女血清 0.25mL　精懸浮液(40×106/mL) 0.025mL} 32℃/60min精活動率(T% )　待檢豚鼠血清 0.05mL

?、?對照組：　處女血清 0.25mL　精懸浮液(40×106/mL) 0.025mL } 32℃/60min 精活動率(C%)　滅活豚鼠血清(或不加豚鼠血清) 0.05mL　兩者比較 C/T≥1.2 判為有毒性，<1.2 判為無毒性?！“?1.2以下的豚鼠血清合并后，再測補(bǔ)體效價(jià)?！〈送庥腥擞?AB 血型的人血清作補(bǔ)體，不過 AB 血型人血清的補(bǔ)體效價(jià)比豚鼠血清要低得多，反應(yīng)系統(tǒng)加入 0.05mL 血清仍不能充分把制動抗體檢出，因此一般不采用。　

二、精洗滌 精采用丈夫或他人的都可以，都能取得相同的結(jié)果。但由于不孕婦女血中的精制動抗體多數(shù)是由精漿抗原所產(chǎn)生的抗體，精漿有中和抗體的作用，會影響測定的結(jié)果。所以制備精懸液時(shí)，首先要用 10% 家兔滅活血清洗滌精，盡可能把精漿成分除去，以免降低精制動抗體的效價(jià)。

 凍干新鮮補(bǔ)體豚鼠血清的正確運(yùn)用